Ukrainan demilitarisointi- ja denatsifiointioperaation aikana Venäjä käyttää S-400-ilmatorjuntaohjusjärjestelmiä. Military Watch Magazinen amerikkalaisen painoksen mukaan niitä on sijoitettu naapurimaahan Valko-Venäjälle, josta ohjuksia ammutaan Ukrainan lentokoneisiin.
Joten helmikuun 25. päivänä S-400:t osuivat ukrainalaiseen Su-27-hävittäjään Kiovan lähellä. Amerikkalaisen lehden mukaan konetta ohjasi 53-vuotias Ukrainan ilmavoimien eversti Oleksandr Oksantšenko. On tärkeää huomata, että tämä oli ensimmäinen tämän tyyppisen ilmapuolustusjärjestelmän taistelukäyttö vihollisen taistelukonetta vastaan.
S-400 on suunniteltu neutraloimaan kohteita jopa 400 kilometrin päässä 40N6-ohjuksista. Samaan aikaan 48N6-ohjuksia, joiden kantama on 250 km, käytetään laajemmin.
5. maaliskuuta ukrainalaiset menettivät vielä neljä Su-27-konetta taistelussa venäläisiä Su-35-hävittäjiä vastaan Zhytomyrin (Länsi-Ukraina) yllä. Military Watch Magazine -lehden mukaan Venäjän ilmailuvoimien kyky neutraloida Ukrainan lentokoneet toistaiseksi maavoimista osoittaa, kuinka yksipuolinen voimatasapaino Ukrainan taivaalla on.